一、RNA的提取

二(er)、DNase|消(xiao)化樣(yang)品RNA 中的DNA

三(san)、RNA瓊脂糖凝膠(jiao)電泳

四、RNA反轉錄為(wei)cDNA

Real-Time PCR引物設計的要求

1Tm=55~65℃

2 GC=30~80%

3 PCR擴(kuo)增(zeng)產物長度(du):引(yin)物的產物大(da)小不(bu)要太大(da)，一般在(zai)80~300 bp之間都可。

4 引(yin)物的(de)退火溫度要(yao)高，一般要(yao)在60 ℃以(yi)上。

五、cDNA與引物質量(liang)檢(jian)測

選擇(ze)特異性好，擴增效率(lv)高的引物作為實時熒光使用引物。

六、利用相對(dui)定量的(de)方法分(fen)析目(mu)的(de)基因表(biao)達量的(de)情況:

常(chang)用的看(kan)家(jia)基因有(you)B-actin，GAPDH，18S rRNA

七、定量PCR檢測

八、擴增曲(qu)線(xian)(xian)和溶解曲(qu)線(xian)(xian)

溶解曲線全部為單峰表明(ming)為特(te)異(yi)性擴(kuo)(kuo)增(zeng)，熒光(guang)擴(kuo)(kuo)增(zeng)曲線可以分成三(san)個階(jie)(jie)(jie)段;熒光(guang)背(bei)暑信(xin)號階(jie)(jie)(jie)段，熒光(guang)信(xin)號指數擴(kuo)(kuo)增(zeng)階(jie)(jie)(jie)段和平(ping)臺期。

我們(men)擁(yong)有專業的(de)(de)(de)實(shi)驗室、先進的(de)(de)(de)實(shi)驗設備和經(jing)驗豐富的(de)(de)(de)科研(yan)技(ji)術(shu)人(ren)(ren)(ren)員。技(ji)術(shu)團(tuan)隊(dui)包括研(yan)究(jiu)(jiu)員（博士(shi)后(hou)）2人(ren)(ren)(ren)，助理研(yan)究(jiu)(jiu)員（博士(shi)）4人(ren)(ren)(ren)，核心研(yan)究(jiu)(jiu)員（碩士(shi)）15人(ren)(ren)(ren)，主要(yao)致力于基(ji)因(yin)(yin)組學(xue)、轉錄組學(xue)、蛋白質組學(xue)、代(dai)謝組學(xue)、生(sheng)物(wu)化學(xue)、病理檢測(ce)、基(ji)因(yin)(yin)檢測(ce)等(deng)技(ji)術(shu)在科研(yan)中的(de)(de)(de)應用與推廣(guang)。通過(guo)高度(du)細分(fen)、較好(hao)的(de)(de)(de)的(de)(de)(de)服(fu)(fu)務平(ping)臺，為廣(guang)大客戶(hu)提(ti)供(gong)了完善的(de)(de)(de)技(ji)術(shu)解決方案和服(fu)(fu)務。目前，及，涉及臨床醫學(xue)、腫(zhong)瘤(liu)生(sheng)物(wu)學(xue)、免疫(yi)學(xue)、細胞(bao)生(sheng)物(wu)學(xue)、分(fen)子(zi)生(sheng)物(wu)學(xue)等(deng)生(sheng)命科學(xue)、醫學(xue)等(deng)諸多領域。